Página 1 dos resultados de 781 itens digitais encontrados em 0.043 segundos

Otimização das condições de cultivo do fungo Papulaspora immersa para produção de substâncias bioativas; Optimization of culture conditions the endophytic fungus Papulaspora immersa for production of bioactivities substance 2008.

Braun, Glaucia Hollaender
Fonte: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP Publicador: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
Tipo: dissertação de mestrado Formato: application/pdf
Publicado em 22/10/2008 Português
Relevância na Pesquisa
36.2%
Os antibióticos vem sendo empregados por décadas no combate as infecções bacterianas mas, muitos deles são usados como agentes antitumorais, imunissupressores, lipocolesterolégicos, inibidores de enzimas e agentes antiparasitários. Os microrganismos, e dentre eles os fungos, são produtores de metabólitos secundáros, com atividades biológicas, cuja produção é regulada para impedir uma superprodução desnecessária. O aumento na produção de uma substância só é conseguido desregulando tal processo o que é pssível através de manipulação genética ou nutricional. O presente projeto teve por objetivo otimizar as condições de cultivo do fungo endofítico Papulaspora immersa para incrementar a produção de metabólitos secundários com atividades antibacteriana, antiparasitária, antifúngica e antitumoral. O fungo foi cultivado em duas etapas: inicialmente em meio pré-fermentativo por 48 horas seguido de transferência da massa micelial obtida para meio fermentativo Czapek e nesta etapa vários parâmetros que alteram as condições de cultivo foram variados. Os cultivos foram realizados assepticamente a 30°C e sob agitação constante e o filtrado das culturas foram particionados com solventes orgânicos obtendo-se os extratos...

Otimização do crescimento e desenvolvimento de teca (Tectona grandis Linn f.) in vitro; Optimization of teak (Tectona grandis Linn f.) growth and development in vitro

Nery, Felipe Uassurê
Fonte: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP Publicador: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
Tipo: dissertação de mestrado Formato: application/pdf
Publicado em 11/11/2011 Português
Relevância na Pesquisa
35.95%
O crescente aumento no uso da micropropagação de teca como forma de produção de clones com qualidades genotípicas e fenotípicas selecionadas a partir de árvores de elite, determinou a importância desse método, pois origina plantações com maior qualidade e uniformidade, agregando maior valor ao preço da madeira no mercado. O uso de sementes para a obtenção de mudas é uma técnica menos onerosa, porém resulta em plantas com tamanhos desiguais e não há um padrão na qualidade da madeira, essa técnica depende também da época de produção de sementes e, portanto é restrita a um período do ano. A micropropagação permite a clonagem em larga escala das árvores de elite em tempo e espaço reduzidos, podendo ser realizada em qualquer época do ano, além disso, permite a formação de mudas totalmente livres de pragas e patógenos. Faz-se necessário, maiores estudos com meio de cultura para Tectona grandis, pois os materiais relacionados a esse assunto são escassos. Para que a técnica do cultivo in vitro da teca seja incrementada, objetivou-se nesse experimento, otimizar o crescimento dos explantes de três clones diferentes, testando a eficiência de 6 meios de cultura com diferentes formulações nutricionais e constatar qual deles apresenta a melhor resposta para cada clone. O estudo contou com 6 tratamentos (MS...

Técnicas para otimização da multiplicação in vitro de brotações de Eucalyptus citriodora (Hook) K.D. Hill & L.A.S. Johnson; Optimization techniques for shoots in vitro multiplication of Eucalyptus citriodora (Hook) KDHill & LASJohnson

Almeida, Lívia Vieira de
Fonte: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP Publicador: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
Tipo: dissertação de mestrado Formato: application/pdf
Publicado em 12/12/2012 Português
Relevância na Pesquisa
35.95%
Pelas qualidades silviculturais e da madeira, o Eucalyptus citriodora apresenta-se como uma excelente espécie para usos múltiplos, destacando-se a extração de óleo essencial para indústria de perfumaria e desinfetantes. Entre as espécies de eucalipto é a que apresenta madeira de alta densidade, dependendo das condições edafoclimáticas e procedência. Porém, as limitações referentes à disponibilidade de sementes e dificuldades de enraizamento de estacas e miniestacas inviabilizam sua multiplicação comercial. Sendo assim, a utilização da micropropagação objetiva acelerar os métodos convencionais de clonagem, de genótipos selecionados. Brotações com uma a três gemas de aproximadamente 1,5cm, foram transferidas para três diferentes meios básicos de cultura, MS (MURASHIGE; SKOOG, 1962), WPM (LLOYD; MCCOWN, 1980) e JADS (CORREIA et al., 1995), suplementados a cada subcultivo com concentrações combinadas e crescentes de benzilaminopurina (BAP- 0,025; 0,05 e 0,50mg L-1) e ácido naftalenoacético (ANA) (0,0025; 0,005 e 0,050mg L-1), sendo que para a maior concentração de ambos os fitorreguladores foram realizados 4 subcultivos, totalizando 6 subcultivos. Vinte repetições de cada tratamento foram separadas para avaliação dos parâmetros fisiológicos (peso da matéria fresca...

Otimização de sistema de cultivo de baixo custo de Nannochloropsis gaditana Lubián 1982 para produção de biodiesel; Optimization of low cost culture system of Nannochloropsis gaditna Lubián, 1982 for biodiesel production

Kanemoto, Fernando Takashi
Fonte: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP Publicador: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
Tipo: dissertação de mestrado Formato: application/pdf
Publicado em 15/02/2013 Português
Relevância na Pesquisa
36%
O desenvolvimento de fontes de energia renováveis tem se tornado cada vez mais necessário e, nesse contexto, os biocombustíveis têm um importante papel. Este trabalho teve como objetivo otimizar a produtividade de biomassa e de lipídios da microalga Nannochloropsis gaditana, em cultivos de baixo-custo visando à produção de biodiesel. Um sistema de cultivo foi concebido com materiais acessíveis e os experimentos testaram o efeito de diferentes exposições das células ao claro-escuro, sob irradiância de 800?E m-2 s-1. Foram testadas três profundidades de cultivo (2, 4 e 8 cm) e duas taxas de aeração (0,25 e 1,00 L min-1 por L de cultivo). A penetração de luz nos cultivos e o rendimento de biomassa seca foram monitorados diariamente. Altos rendimentos de biomassa e lipídios foram alcançados. Os valores máximos foram observados no experimento com 4 cm de profundidade e maior taxa de aeração: 13,83 g m-2 d-1 de produtividade de biomassa e 20,50% de teor lipídico, resultando em uma produtividade lipídica de 2,84 g m-2 d-1. Estes resultados indicam o potencial da utilização de N. gaditana para aplicação em cultivos de larga escala, uma vez que o rendimento lipídico observado foi superior ao da soja, principal matéria-prima vegetal para produção de biodiesel. O sistema de cultivo desenvolvido pode ser inserido em um processo de scaling up em cultivos abertos de grande escala.; The development of renewable energy sources has becoming an increasing necessity and...

Seleção de microalgas dos gêneros Desmodesmus e Scenedesmus produtoras de lipídeos: otimização do cultivo e aplicação do efluente doméstico de reator UASB como substrato alternativo à produção de biodiesel; Selection of lipid-bearing microalgae of the genus Desmodesmus and Scenedesmus: culture optimization and application of domestic wastewater from UASB reactor as an alternative substrate for the production of biodiesel

Rossi, Raquel Andrade de
Fonte: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP Publicador: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
Tipo: Tese de Doutorado Formato: application/pdf
Publicado em 01/11/2013 Português
Relevância na Pesquisa
66.23%
Microalgas são interessantes fontes de lipídeos para produção de biodiesel. No entanto, seus cultivos para tal finalidade são apenas viáveis do ponto de vista ambiental e econômico se apresentarem elevadas produtividades de biomassa e de lipídeos e estiverem associados ao uso de efluentes. A presente pesquisa estudou as condições de cultivo das microalgas Desmodesmus e Scenedesmus, considerando o conteúdo lipídico para produção de biodiesel, aliado à análise da eficiência de remoção de nutrientes pelas cepas, além da avaliação do efluente de reator UASB (esgoto sanitário) como meio alternativo ao cultivo. Dentre 22 cepas de microalgas isoladas de ambientes de água doce e lagoas de estabilização, 2 foram selecionadas para otimização de seus cultivos diante das suas capacidades de acumularem lipídeos e crescerem em diferentes condições físico-químicas. Delineamento Composto Central Rotacional (DCCR) foi aplicado para otimização das condições de crescimento celular das cepas LE17 (34,5ºC, pH 8,2 e 200 μmol.m-2.s-1) e ITU07 (34ºC, pH 8,2 e 180 μmol.m-2.s-1). Definidas as condições ótimas, foram realizados os cultivos mixotróficos das cepas em batelada (8 litros) em meio sintético e em efluente de reator UASB (50%). Nos cultivos em efluente de reator UASB as produtividades de biomassa das cepas LE17 e ITU07 foram...

Screening of culture condition for xylanase production by filamentous fungi

Garcia Simoes, Maria Lucia; Tauk-Tornisielo, Samia Maria; Tapia Tapia, Daniel Mario
Fonte: Academic Journals Publicador: Academic Journals
Tipo: Artigo de Revista Científica Formato: 6317-6326
Português
Relevância na Pesquisa
36%
The objective of this research was to investigate xylanase production by filamentous fungi (Trichoderma viride) to determine the best cultivation conditions in the process, aiming toward optimization of enzyme production. The best temperature, as well as the best carbon source, for biomass production was determined through an automated turbidimetric method (Bioscreen-C). The enzyme activity of this fungus was separately evaluated in two solid substrates (wheat and soybean bran) and in Vogel medium, pure and by adding other carbon sources. Temperature effects, cultivation time, and spore concentrations were also tested. The best temperature and carbon source for enzyme and biomass production was 25 C and sorbitol, respectively. Maximum xylanase activity was achieved when the fungus was cultivated in wheat bran along with sorbitol (1%, w/v), using a spore concentration of 2 x 10(6) spores. mL(-1), pH 5.0, for 144 h cultivation. The study demonstrated not only the importance of the nature of the substrate in obtaining a system resistant to catabolic repression, but also the importance of the culture conditions for biosynthesis of this enzyme. T. viride showed a high potential for xylanase production under the conditions presented in these assays.

Keratinase production by new strain of Bacillus Amyloliquefaciens: Application of statistical experimental design for optimization of keratinase production

Fonseca, Carolina Ferrarezi da; Cortezi, Mariana; Bolner de Lima, Cristian J.; Marchetto, Reinaldo; Macari, Marcos; Contiero, Jonas
Tipo: Artigo de Revista Científica Formato: 307-317
Português
Relevância na Pesquisa
36%
Feathers are rich in amino acids and can be employed as a dietary protein supplement for animal feed. Microbial degradation is an alternative technology for improving the nutritional value of feathers. Other potential applications of keratinase include use in the leather industry, detergents and medicine as well as the pharmaceutical for the treatment of acne, psoriasis and calluses. A new keratinolytic enzyme production bacterium was isolated from a poultry processing plant. To improve keratinase yield, statistically based experimental designs were applied to optimize three significant variables: temperature, substrate concentration (feathers) and agitation speed. Response surface methodology demonstrated an increase in keratinolytic activity at temperature, agitation speed and substrate concentration of 26.6°C, 150 rpm and 2%, respectively. Liquid chromatography revealed the release of amino acids in the Bacillus amyloliquefaciens culture broth, thereby demonstrating the potential of feather meal in the animal feed industry. © Global Science Publications.

Produção, otimização e caracterização bioquímica de fitase produzida por Burkholderia sp; Production, optimization and biochemical characterization of phytase produced by Burkholderia sp

Ana Luiza Fanchini Messas
Fonte: Biblioteca Digital da Unicamp Publicador: Biblioteca Digital da Unicamp
Tipo: dissertação de mestrado Formato: application/pdf
Publicado em 28/07/2011 Português
Relevância na Pesquisa
36.14%
O ácido fítico é a principal fonte de armazenamento de fósforo em cereais e legumes, sendo que sua forma sal é denominada fitato. O fitato não é digerido pelo trato gastrointestinal de animais monogástricos e, na alimentação humana, o fitato é considerado um fator antinutricional devido à sua capacidade quelante para vários metais e por ligar-se às proteínas, conseqüentemente diminuindo a biodisponibilidade de proteínas e de minerais nutricionalmente importantes, como o zinco, ferro, cálcio, entre outros. Uma das estratégias mais efetivas para a redução do conteúdo de fitato em rações animais e alimentos tem sido a utilização de enzimas exógenas degradadoras de fitato, as fitases. Sendo assim, durante os últimos 20 anos intensificaram-se os estudos em busca de novas fontes desta enzima. A fitase está amplamente distribuída na natureza, sendo encontrada em animais, plantas e micro-organismos. A enzima presente em plantas é menos resistente ao tratamento térmico e é menos estável às condições fisiológicas do trato gastrointestinal, já a de microorganismos pode resistir a altas temperaturas, dependendo da linhagem. Neste estudo, realizou-se a produção, otimização do meio e das condições de cultivo e caracterização de fitase produzida pela bactéria Burkholderia sp. Foi definido como o meio de cultivo otimizado para a produção de fitase de Burkholderia sp. em frascos agitados em 72 horas de fermentação: fitato de sódio 0...

Estudo de otimização das condições da fermentação para produção de ácido propiônico por Propionibacterium acidipropionici utilizando xarope de cana-de-açúcar; Optimization study of fermentation conditions for propionic acid production with Propionibacterium acidipropionici using sugarcane syrup

Luige Armando Llerena Calderón
Fonte: Biblioteca Digital da Unicamp Publicador: Biblioteca Digital da Unicamp
Tipo: dissertação de mestrado Formato: application/pdf
Publicado em 31/07/2012 Português
Relevância na Pesquisa
36.08%
O ácido propiônico possui grande importância para a economia devido às suas diversas aplicações nas indústrias químicas e alimentícias. Atualmente, ele é produzido a partir de derivados do petróleo, mas as atuais preocupações ambientais relacionadas às emissões de carbono provenientes de fontes fósseis tornam a sua produção por rotas biológicas e fontes renováveis um processo cada vez mais atraente. O ácido propiônico também pode ser produzido a partir do metabolismo heterofermentativo da Propionibacterium acidipropionici. Embora existam diversos estudos que visem à otimização do processo de produção de ácido propiônico por rotas biológicas, ainda não existe nenhum processo eficiente que possa ser escalonado a um nível industrial. Consequentemente, o foco deste trabalho está no uso de ferramentas de planejamento experimental para a produção de ácido propiônico a partir de xarope de cana-de-açúcar (caldo de cana-de-açúcar concentrado), levando-se em conta três respostas de extrema importância para este bioprocesso: rendimento, produtividade volumétrica e a resposta de menor formação de ácido succínico (RMS). Na primeira parte do trabalho foi realizada a adequação de um método cromatográfico para a quantificação dos açúcares presentes no xarope de cana-de-açúcar...

The impact of microcarrier culture optimization on the glycosylation profile of a monoclonal antibody

Costa, A. R.; Withers, Joanne; Rodrigues, E.; McLoughlin, Niaobh; Henriques, Mariana; Oliveira, Rosário; Rudd, Pauline M.; Azeredo, Joana
Fonte: Springer Publicador: Springer
Tipo: Artigo de Revista Científica
Publicado em //2013 Português
Relevância na Pesquisa
36.02%
Microcarriers are widely used for the large-scale culture of attachment-dependent cells with increased cell densities and, ultimately, higher product yield. In these processes, the specific culture conditions can affect the quality of the product, which is closely related to its glycosylation pattern. Furthermore, the lack of studies in the area reinforces the need to better understand the effects of microcarrier culture in product glycosylation. Consequently, in this work, the glycosylation profile of a monoclonal antibody (mAb) produced by adherent CHO-K1 cells grown in Cytodex 3 was evaluated under different conditions, and compared to that obtained of typical adherent cultures. It was found that microcarrier cultures result in a glycosylation profile with different characteristics from T-flask cultures, with a general increase in galactosylation and decrease in fucosylation levels, both with a potentially positive impact on mAb activity. Sialylation also varied but without a general tendency. This study then showed that the specific culture conditions used in microcarrier culture influence the mAb glycan profile, and each functional element (galactose, core fucose, sialic acid) is independently affected by these conditions. In particular...

Optimization of the culture medium composition using response surface methodology for new recombinant cyprosin B production in bioreactor for cheese production

Sampaio, Pedro N.; Calado, C.R.C.; Sousa, Lisete; Bressler, David C.; Pais, Maria Salomé; Fonseca, Luís Pina
Fonte: Springer-Verlag Publicador: Springer-Verlag
Tipo: Artigo de Revista Científica
Publicado em //2010 Português
Relevância na Pesquisa
36.18%
The optimization of culture medium compositionwas carried out for improvement the recombinantcyprosin B production, an enzyme with high milk-clottingactivity. Response surface methodology (RSM) wasapplied to evaluate the effect of variables namely glucose,yeast extract (YE) and bactopeptone present in the culturemedium, used for recombinant cyprosin B production bytransformed Saccharomyces cerevisiae BJ1991 strain inshake-flask and bioreactor culture conditions. The centracomposite experimental design (CCD) was adopted toderive a statistical model for optimizing the composition ofthe fermentation medium. The optimal concentration estimatedfor each variable related to a theoretical maximumof cyprosin B activity (488 U mL-1) was 30 g L-1 glucose,15 g L-1 YE and 27 g L-1 bactopeptone. The optimizedmedium composition, based on empirical model, ledto a cyprosin B activity of 519 U mL-1, which correspondsto an increase of 46%. The fermentation using optimizedculture medium in a 5-L bioreactor allowed a significantincrease in biomass (82%) and recombinant cyprosin Bproduction (139%). The improvement in the recombinantcyprosin B production after optimization process can beconsidered adequate for large-scale applications, and theclotting activity of cyprosin B account for their use inindustrial cheese making.

Statistical optimization of culture conditions by response surface methodology for synthesis of lipase with Enterobacter aerogenes

Kumari,Annapurna; Mahapatra,Paramita; Banerjee,Rintu
Fonte: Instituto de Tecnologia do Paraná - Tecpar Publicador: Instituto de Tecnologia do Paraná - Tecpar
Tipo: Artigo de Revista Científica Formato: text/html
Publicado em 01/12/2009 Português
Relevância na Pesquisa
36.01%
Optimization of lipase production by Enterobacter aerogenes was carried out using response surface methodology (RSM) where the statistical model was obtained by fractional factorial central composite design. The influence of various physico-chemical parameters, viz. temperature, oil concentration, inoculum volume, pH and incubation period on lipase production was examined. Optimization of physico-chemical parameters resulted 1.4- fold increase in lipase activity. The optimum levels of parameters were 34°C, oil concentration 3%, inoculum volume 7%, pH 7 and incubation time 60 h for obtaining a maximum lipase activity of 27.25 U/ml.

Optimization of flask culture medium and conditions for hyaluronic acid production by a streptococcus equisimilis mutant nc2168

Chen,Yong-Hao; Li,Jun; Liu,Li; Liu,Hong-Zhi; Wang,Qiang
Fonte: Sociedade Brasileira de Microbiologia Publicador: Sociedade Brasileira de Microbiologia
Tipo: Artigo de Revista Científica Formato: text/html
Publicado em 01/12/2012 Português
Relevância na Pesquisa
36.13%
A mutant designated NC2168, which was selected from wild-type Streptococcus equisimilis CVCC55116by ultraviolet ray combined with60Co-? ray treatment and does not produce streptolysin, was employed to produce hyaluronic acid (HA). In order to increase the output of HA in a flask, the culture medium and conditions for NC2168 were optimized in this study. The influence of culture medium ingredients including carbon sources, nitrogen sources and metal ions on HA production was evaluated using factional factorial design. The mathematical model, which represented the effect of each medium component and their interaction on the yield of HA, was established by the quadratic rotary combination design and response surface method. The model estimated that, a maximal yield of HA could be obtained when the concentrations of yeast extract, peptone, glucose, and MgSO4 were set at 3 g/100 mL, 2 g/100 mL, 0.5 g/100 mL and 0.15 g/100 mL, respectively. Compared with the values obtained by other runs in the experimental design, the optimized medium resulted in a remarkable increase in the output of HA and the maximum of the predicted HA production was 174.76 mg/L. The model developed was accurate and reliable for predicting the production of HA by NC2168.Cultivation conditions were optimized by an orthogonal experimental design and the optimal conditions were as follows: temperature 33ºC...

Optimizing a culture medium for biomass and phenolic compounds production using Ganoderma lucidum

Zárate-Chaves,Carlos Andrés; Romero-Rodríguez,María Camila; Niño-Arias,Fabián Camilo; Robles-Camargo,Jorge; Linares-Linares,Melva; Rodríguez-Bocanegra,María Ximena; Gutiérrez-Rojas,Ivonne
Fonte: Sociedade Brasileira de Microbiologia Publicador: Sociedade Brasileira de Microbiologia
Tipo: Artigo de Revista Científica Formato: text/html
Publicado em 01/01/2013 Português
Relevância na Pesquisa
35.97%
The present work was aimed at optimizing a culture medium for biomass production and phenolic compounds by using Ganoderma lucidum. The culture was optimized in two stages; a Plackett-Burman design was used in the first one for identifying key components in the medium and a central composite design was used in the second one for optimizing their concentration. Both responses (biomass and phenolic compounds) were simultaneously optimized by the latter methodology regarding desirability, and the optimal concentrations obtained were 50.00 g/L sucrose, 13.29 g/L yeast extract and 2.99 g/L olive oil. Maximum biomass production identified in these optimal conditions was 9.5 g/L and that for phenolic compounds was 0.0452 g/L, this being 100% better than that obtained in the media usually used in the laboratory. Similar patterns regarding chemical characterization and biological activity towards Aspergillus sp., from both fruiting body and mycelium-derived secondary metabolites and extracts obtained in the proposed medium were observed. It was shown that such statistical methodologies are useful for optimizing fermentation and, in the specific case of G. lucidum, optimizing processes for its production and its metabolites in submerged culture as an alternative to traditional culture.

Optimizing a culture medium for biomass and phenolic compounds production using Ganoderma lucidum

Zárate-Chaves,Carlos Andrés; Romero-Rodríguez,María Camila; Niño-Arias,Fabián Camilo; Robles-Camargo,Jorge; Linares-Linares,Melva; Rodríguez-Bocanegra,María Ximena; Gutiérrez-Rojas,Ivonne
Fonte: Sociedade Brasileira de Microbiologia Publicador: Sociedade Brasileira de Microbiologia
Tipo: Artigo de Revista Científica Formato: text/html
Publicado em 01/01/2013 Português
Relevância na Pesquisa
35.97%
The present work was aimed at optimizing a culture medium for biomass production and phenolic compounds by using Ganoderma lucidum. The culture was optimized in two stages; a Plackett-Burman design was used in the first one for identifying key components in the medium and a central composite design was used in the second one for optimizing their concentration. Both responses (biomass and phenolic compounds) were simultaneously optimized by the latter methodology regarding desirability, and the optimal concentrations obtained were 50.00 g/L sucrose, 13.29 g/L yeast extract and 2.99 g/L olive oil. Maximum biomass production identified in these optimal conditions was 9.5 g/L and that for phenolic compounds was 0.0452 g/L, this being 100% better than that obtained in the media usually used in the laboratory. Similar patterns regarding chemical characterization and biological activity towards Aspergillus sp., from both fruiting body and mycelium-derived secondary metabolites and extracts obtained in the proposed medium were observed. It was shown that such statistical methodologies are useful for optimizing fermentation and, in the specific case of G. lucidum, optimizing processes for its production and its metabolites in submerged culture as an alternative to traditional culture.

Optimization of zofimarin production by an endophytic fungus, Xylaria sp. Acra L38

Chaichanan,Jirapan; Wiyakrutta,Suthep; Pongtharangkul,Thunyarat; Isarangkul,Duangnate; Meevootisom,Vithaya
Fonte: Sociedade Brasileira de Microbiologia Publicador: Sociedade Brasileira de Microbiologia
Tipo: Artigo de Revista Científica Formato: text/html
Publicado em 01/01/2014 Português
Relevância na Pesquisa
36.08%
To optimize the medium for high zofimarin production, sucrose maltose, glucose, tryptone and peptone were used in an orthogonal array design experiment, where the highest value of zofimarin produced was 25.6 µg/mL. This value was about 3 times higher than that obtained with Czapek yeast extract (CzYE) culture medium. A study with Plackett-Burman design showed that sucrose, maltose, glucose and NaNO3 were significant factors in zofimarin production. Further studies using central composite design (CCD) showed the significance of glucose and the interactions of these critical components affecting zofimarin production. Multiple regression analysis of the data yielded a poor fit as shown by the mismatch of the model with these variable factors. When a polynomial equation was applied, the maximum zofimarin production was predicted to be 201.9 µg/mL. Experimental verification yielded a much lower amount of zofimarin, at around 70 µg/mL. Reconsideration of the CCD data and repetition of some runs with high zofimarin production resulted in reproducible zofimarin yield at 79.7 µ/mL. Even though the amount was lower than the predicted value, the medium optimization study was considered to be quite successful as the yield increased to around 8 times that obtained with the original CzYE culture medium.

Culture optimization for the emergent zooplanktonic model organism Oikopleura dioica

Bouquet, Jean-Marie; Spriet, Endy; Troedsson, Christofer; Otterå, Helen; Chourrout, Daniel; Thompson, Eric M.
Fonte: Oxford University Press Publicador: Oxford University Press
Tipo: text
Português
Relevância na Pesquisa
36.06%
The pan-global marine appendicularian, Oikopleura dioica, shows considerable promise as a candidate model organism for cross-disciplinary research ranging from chordate genetics and evolution to molecular ecology research. This urochordate, has a simplified anatomical organization, remains transparent throughout an exceptionally short life cycle of less than 1 week and exhibits high fecundity. At 70 Mb, the compact, sequenced genome ranks among the smallest known metazoan genomes, with both gene regulatory and intronic regions highly reduced in size. The organism occupies an important trophic role in marine ecosystems and is a significant contributor to global vertical carbon flux. Among the short list of bona fide biological model organisms, all share the property that they are amenable to long-term maintenance in laboratory cultures. Here, we tested diet regimes, spawn densities and dilutions and seawater treatment, leading to optimization of a detailed culture protocol that permits sustainable long-term maintenance of O. dioica, allowing continuous, uninterrupted production of source material for experimentation. The culture protocol can be quickly adapted in both coastal and inland laboratories and should promote rapid development of the many original research perspectives the animal offers.

An Engineered Approach to Stem Cell Culture: Automating the Decision Process for Real-Time Adaptive Subculture of Stem Cells

Ker, Dai Fei Elmer; Weiss, Lee E.; Junkers, Silvina N.; Chen, Mei; Yin, Zhaozheng; Sandbothe, Michael F.; Huh, Seung-il; Eom, Sungeun; Bise, Ryoma; Osuna-Highley, Elvira; Kanade, Takeo; Campbell, Phil G.
Fonte: Public Library of Science Publicador: Public Library of Science
Tipo: text
Publicado em 16/11/2011 Português
Relevância na Pesquisa
35.97%
Current cell culture practices are dependent upon human operators and remain laborious and highly subjective, resulting in large variations and inconsistent outcomes, especially when using visual assessments of cell confluency to determine the appropriate time to subculture cells. Although efforts to automate cell culture with robotic systems are underway, the majority of such systems still require human intervention to determine when to subculture. Thus, it is necessary to accurately and objectively determine the appropriate time for cell passaging. Optimal stem cell culturing that maintains cell pluripotency while maximizing cell yields will be especially important for efficient, cost-effective stem cell-based therapies. Toward this goal we developed a real-time computer vision-based system that monitors the degree of cell confluency with a precision of 0.791±0.031 and recall of 0.559±0.043. The system consists of an automated phase-contrast time-lapse microscope and a server. Multiple dishes are sequentially imaged and the data is uploaded to the server that performs computer vision processing, predicts when cells will exceed a pre-defined threshold for optimal cell confluency, and provides a Web-based interface for remote cell culture monitoring. Human operators are also notified via text messaging and e-mail 4 hours prior to reaching this threshold and immediately upon reaching this threshold. This system was successfully used to direct the expansion of a paradigm stem cell population...

Optimization of a MRC-5 Cell Culture Process for the Production of a Smallpox Vaccine

Wu, Florence; Reddy, Kesav; Nadeau, Isabelle; Gilly, John; Terpening, Sara; Clanton, David J.
Fonte: Kluwer Academic Publishers Publicador: Kluwer Academic Publishers
Tipo: text
Português
Relevância na Pesquisa
36.14%
A cell culture process adaptable to produce smallpox vaccine at large scale has been developed. To achieve this, Design of Experiments (DOE) was applied to identify and optimize critical cell culture process parameters for MRC-5 cell growth and recovery during cell expansion. For cell growth, a 25?1 partial factorial (two level, five factor, 16 conditions) study was designed to evaluate the effects of basal media, seeding density, culture volume, feeding frequency and serum concentration on population doubling level (PDL) after 6–7 days in adherent T-flask cultures. Results indicated that lowering the cell density to 1×104 cells/cm2, increasing the culture volume to 0.5 ml/cm2 and increasing serum concentration to 20% significantly improved cell expansion. These findings correlated with PDLs above 2.0 and cell densities above 1×105 cells/cm2 at the end of the study period. For cell recovery at passaging, a similar DOE was used to evaluate the effect of trypsin concentration, solution temperature, duration of treatment, incubation temperature and duration of standing time between quenching and reseeding. By increasing the trypsin treatment duration to 60 min and lowering the standing time between quenching and reseeding to within 1 h...

The impact of microcarrier culture optimization on the glycosylation profile of a monoclonal antibody

Costa, Ana Rita; Withers, Joanne; Rodrigues, Maria Elisa; McLoughlin, Niaobh; Henriques, Mariana; Oliveira, Rosário; Rudd, Pauline M; Azeredo, Joana
Fonte: Springer International Publishing AG Publicador: Springer International Publishing AG
Tipo: text
Publicado em 28/01/2013 Português
Relevância na Pesquisa
36.02%
Microcarriers are widely used for the large-scale culture of attachment-dependent cells with increased cell densities and, ultimately, higher product yield. In these processes, the specific culture conditions can affect the quality of the product, which is closely related to its glycosylation pattern. Furthermore, the lack of studies in the area reinforces the need to better understand the effects of microcarrier culture in product glycosylation. Consequently, in this work, the glycosylation profile of a monoclonal antibody (mAb) produced by adherent CHO-K1 cells grown in Cytodex 3 was evaluated under different conditions, and compared to that obtained of typical adherent cultures. It was found that microcarrier cultures result in a glycosylation profile with different characteristics from T-flask cultures, with a general increase in galactosylation and decrease in fucosylation levels, both with a potentially positive impact on mAb activity. Sialylation also varied but without a general tendency. This study then showed that the specific culture conditions used in microcarrier culture influence the mAb glycan profile, and each functional element (galactose, core fucose, sialic acid) is independently affected by these conditions. In particular...